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关于四氯化碳损伤肝脏的机理目前亦有两种假说。有人认为四氯化碳在肝细胞内被细胞色素P450(以下简称P450)代谢激活后产生三氯甲基(+CCl3),它能引起内质网膜脂质的过氧化,使磷脂分子裂解,导致膜结构和功能的破坏。另有人强调,三氯甲基自由基与内质网膜的大分子如磷脂或蛋白质分子进行共价结合(不可逆性),破坏了膜的完整性,引起细胞坏死。根据以上两种假说,刘耕陶等研究了五味子7种有效成分对四氯化碳引起肝细胞微粒体脂质过氧化及14CCl4与微粒体脂质共价键结合的影响。将五味子有效成分(最终浓度为10(-4)m)加入用苯巴比妥诱导的小鼠肝微粒悬液及含NADPH的缓冲液内,于37℃保温15分钟后,加四氯化碳0.5μl以引起微粒体脂质过氧化,测定过氧化的终末产物丙二酰二醛(MDA)的生成量。结果表明,乙素、丙素、醇乙、酯甲、酯乙均能不同程度地抑制MDA的生成,说明这些化合物能抑制四氯化碳引起的微粒体脂质过氧化。当上述各化合物事先不与NADPH还愿的微粒体温孵,其抑制MDA生成的作用不明显。为了解五味子有效成分抑制四氯化碳引起脂质过氧化作用与450的关系,用P450的特异性酶抑制剂-甲吡(Metyrapone)以抑制P450活性,观察其对五味子抑制MDA生成作用的影响。如五味子有效成分抑制MDA生成作用系通过P450,甲吡能完全阻断五味子对四氯化碳激发MDA生成的抑制作用,说明五味子抑制MDA生成的作用与P405有关系。在共价键结合实验中,上述凡能抑制MDA生成的五味子有效成分能明显抑制14CCl4与肝微粒体脂质的共价结合。
另外,丙素、醇乙、酯甲、酯乙均能明显抑制一氧化碳的生成及NADPH和氧的消耗。而这些化合物对四氯化碳中毒小鼠均有降SGPT作用。根据这些结果,对五味子的某些有效成分在与肝微粒体温孵过程中,很可能有某种活性中间物生成,该活性中间物与P450结合以形成-配基化合物,从而部分地阻断四氯化碳与P450的结合,使四氯化碳的代谢不能正常进行,减少毒性代谢物(自由基)的生成,因而肝细胞损伤相应减轻。
3.对消化系统的作用:3.1.去氧五味子素(Deoxyschizandrin)对实验性胃溃疡及胃酸分泌的作用,实验动物采用Wistar系雄性大鼠或Hartlye系雄性豚鼠,禁食24小时后用于实验。
3.1.1.水浸捆束应激性溃疡:取去氧五味子素(DS),按12.5、50及100mg/kg的剂量分别口服给药,10分钟后浸干23℃水中捆束水浸7小时,测定胃腺部产生的溃疡。
3.1.2.幽门结扎阿斯匹林溃疡:在乙醚麻醉下进行幽门结扎,DS以剂量50、100mg/kg口服或十二指肠内给药后立刻口服阿斯匹林150mg/kg,7小时后测定胃腺部溃疡。
3.1.3.组胺溃疡:大鼠口服DS50、100mg/kgl0分钟后,腹腔注射组胺100mg/kg,4小时后测定胃部溃疡。豚鼠口服30分钟后腹腔注射组胺5mg/kg,2小时后同样测定。
3.1.4.对胃液分泌的作用:在乙醚麻醉下进行幽门结扎后,十二指肠或腹腔注射DS12.5、50、100mg/kg,4小时后测定胃液量、酸度与胃蛋白酶活性。
3.1.5.对胃液分泌刺激药物的作用:选择胃酸分泌刺激药物为碳酰胆碱(Carbachol,20μg/kg,肌肉注射).组胺(10mg/kg,肌肉注射),四肽胃泌素(Tetragastrin,500μg/kg,肌肉注射)及脱氧葡萄糖(2-deoxy-D-glucose,200mg/kg,静脉注射)。在投与刺激药30分钟前十二指肠内给与DS。隔1小时用10ml生理盐水灌流测定酸度。结果表明DS对各种原因形成的胃溃疡,胃液量的分泌及酸度均有与剂量依存的抑制作用。对胃蛋白酶的活性几乎没有影响。对组胺在四肽胃泌素刺激的胃酸分泌元进有抑制作用,但对碳酰胆碱和脱氧葡萄糖的刺激无显着改变。因此证明DS有显着抗溃疡作用,此作用基于胃酸分泌抑制作用,此乃五味子治疗胃溃疡的机理。
3.2.另有报导,大鼠灌胃戈米辛A,剂量约为1/8半数致死量,对于应激性溃疡的抑制率约为50%;静脉注射戈米辛A对於大鼠胃收缩具有抑制作用,五味子素也有同样作用,并且还有利胆作用和抑制胃分泌作用。就抑制胃溃疡而言,五味子素的作用比戈米辛A强,大鼠口服给药去氧五味子素100mg/kg,具有抗应激性胃溃疡发生的作用。去氧五味子素,乳糖和硬脂酸镁按一定比例混合,能够制得一种消化道抗溃疡药物。以吡啶为溶剂,在90℃用一定量的口服cl3处理五味子素2小时,能够得到脱水五味素(De-hydrateschisandrin)。大鼠口服50mg/kg或100mg/kg脱水五味子素,进行水浸法应激性试验,溃疡指数为14.6±1.2或10.9±1.3,而对照组的溃疡指数为17.9±1.0)。
4.对心血管系统的作用:4.1.五味子成分对离体狗肠系膜动脉收缩的影响:末川守等人研究了从五味子中提取的戈米辛A、B、D、G、H、五味子素、五味子素丙和前戈米辛等木脂素成分对于由PGF2a和CaCl2所引起的离体狗肠系膜动脉收缩所产生的影响,结果发现,这些木脂素成分对于由PGF2a所引起的收缩具有缓解作用,对于由CaCl2所引起的收缩具有抑制作用。戈米辛A、B、D、J和(+)一去氧五味子素对于由去甲肾上腺素引起的收缩具有抑制作用,其中戈米辛J作用最强。此外、末川守等还对人工合成的戈米辛J钠盐进行了研究,戈米辛J钠盐对于狗离体肠系膜动脉由去甲肾上腺素引起的收缩具有抑制作用(ID50=131.8±0.11×10(-6)mol/L),对于由PGF2a引起的收缩具有缓解作用(半数有效量=9.72±0.36×10(-6)mol/L),另外,对于由CaCl2引起的收缩也有抑制作用(ID50=6.96±0.16×10(-6)mol/L)。戈米辛J钠盐对于肠鼠离体心脏具有增加冠脉血流的作用,而且还能够使麻醉狗的冠状动脉血流增。体外试验表明,戈米辛H、J、N和G具有抑制Ca2+引起的狗肠系膜动脉收缩的功能,IC值分别为5.3×10(-4),1.2×10(-5),1.1×10(-4)和1.0×10(-4),而且这4种五味子木脂素成分还具有抑制PGF2a引起的狗肠系膜动脉收缩作用。
4.2.五味子对家兔心血管酶组织化学的影响:健康成年(30-36月龄)家兔20只和低龄(2-3月龄)7只,雌雄兼有。将家兔随机分为成年给药组(简称五味子组)及成年对照组,低龄动物作为比较组(简称低龄组)。所用动物分笼饲养。五味子组使用五味子粉剂按1g/kg体重日伴合食物饲喂。给药30日后,各组动物均同时由耳沿静脉注入空气处死,并立即解剖,迅速取出心、肝、肾等脏器进行恒冷切片。所有切片在同一染缸内分别作有关酶组织化学染色,即三磷酸腺苷酸酶(简称ATP,镁法)、碱性磷酸酶(ALP,萘酚AS磷酸脂法)、5‘核苷酸酶(5’N,铅镁法)、琥珀酸脱氢酶(SDH,偶联法)、单胺氧化酶(MAO,四唑盐法)、酸性a-萘酚脂酶(ANAE,六偶氮副品红法)、葡萄糖-6-磷酸酶(G-6-p,铅法)。乳酸脱氢酶(LDH,四唑盐法)等,另取部分组织经10%中性甲醛固定后脱水作石蜡包埋组织切片,除作HE染色外,还作了甲基绿派若宁染色观察RNA的变化,以上切片染色在显微镜下,对各组动物的心血营组织中酶活性等变化进行对比观察。结果表明五味子有提高同龄动物心肌细胞内核糖核酸(RNA)的作用,能提高心肌细胞、心脏小动脉和肾脏小动脉的ATP、5‘和ALP膜酶的活性:在心肌细胞内线粒体的琥珀酸脱氢酶(SDH)、溶酶体的ANA标记酶、内浆网的G-6-P酶等,五味子组近半数动物酶活性呈不同程度提高。说明五味子有加强和调节心肌细胞和心脏、肾脏小动脉的能量代谢,改善心肌的营养和功能等作用。
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